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毛細管電泳儀的注意事項

更新時間:2023-12-15瀏覽:1054次

毛細管電泳儀以彈性石英毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅(qū)動力,依據(jù)樣品中各組分的淌度(單位電場強度下的遷移速度)和分配行為的差異而實現(xiàn)各組分分離。

 
工作原理
 
毛細管電泳柱中裝載電解液運行時,由于管壁硅羥基的存在會產(chǎn)生電滲流,電滲流將推動整個毛細管柱內(nèi)的溶液定向移動。與一般色譜技術(shù)的主要區(qū)別在于其分離原理不是基于組分在流動相和固定相中分配系數(shù),而是在電場作用下離子遷移速度的不同。
 
注意事項
 
1、進樣系統(tǒng):其較常用的方式主要為流體動力學(xué)進樣和電遷移進樣,該進樣系統(tǒng)結(jié)構(gòu)包括動力和計時控制部件、毛細管和樣品瓶及緩沖液瓶的位置變換控制部件等。
 
2、毛細管清洗裝置和緩沖液填充系統(tǒng):酸堿活化毛細管可保證CE分離結(jié)果,此外,填充緩沖液也是必須的步驟之一。一般毛細管清洗或緩沖液填灌采用正壓或負(fù)壓來實現(xiàn),要求系統(tǒng)具有一定的密閉性。商品化的儀器通常將毛細管清洗過程與進樣過程共享壓力控制機構(gòu),但計時以分鐘為單位,對進樣精度有所影響。
 
3、毛細管及其溫控系統(tǒng):CE分析實驗過程中,焦耳熱效應(yīng)降低分離效率且在一定程度上影響分析結(jié)果的重復(fù)性。因此需要設(shè)計一個溫度可調(diào)的恒溫環(huán)境來降低焦耳熱效應(yīng)同時規(guī)避外界溫度變化對毛細管分離結(jié)果造成的影響。風(fēng)冷和液冷兩種溫控方式較為常用。風(fēng)冷控溫是通過控制空氣對流實現(xiàn)但效果不佳。液冷控溫是將毛細管置于恒溫液體中,一般以水為冷卻介質(zhì),由專門的制冷系統(tǒng)進行冷卻或恒溫并經(jīng)由流路進行循環(huán)。其效果良好,故為常用的溫控方式。
 
4、檢測系統(tǒng):CE應(yīng)用紫外檢測器最為廣泛,其采用柱上檢測方式,結(jié)構(gòu)簡單、操作方便,使用前需在適當(dāng)位置將毛細管外壁涂層的彈性保護層聚酰亞胺膜剝離,讓透明部分對準(zhǔn)光路。可通過灼燒、硫酸腐蝕或者刀片刮除等方式實現(xiàn)涂層剝離。

 

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